[0001] 本发明涉及食用菌栽培技术，具体说就是一种高产优质富硒北虫草栽培方法。 技术背景

　　[0002] 北虫草Cordyceps militaris(Vuill. )Fr.又名北冬虫夏草，北虫草。迄今人们已 从北虫草中检测或分离出多种生物活性物质，其中除各种氨基酸、嘌呤、无机盐和留醇等之 外，还有核苷、多糖、生物碱、环状缩羧肽等。现代医学表明，北虫草提取物有多种药理作用， 如抗肝纤维化，抑制人类肾小球系膜细胞增殖，抗血管生成，改善胰岛素抵抗和胰岛素分 泌，抑制U937白血病细胞生长，抗炎等。

　　[0003] 光照是影响北虫草生长发育重要环境条件之一，研究发现，光对北虫草子座的分 化、形成与子囊壳成熟是十分重要，在无光照条件下，在培养基上北虫草只能形成白色的菌 丝体，与此同时，在适宜条件下子座的色泽与光照强弱有关。此外，研究证实，光照强度对北 虫草转色、产量、栽培周期、子座形态、基质利用效率均有显著影响，同时蓝光是北虫草正常 转色的必需条件，且能促进虫草素的合成，绿光有利于子座的延伸，提高淀粉酶活性，红光 和黄光有利于子座增粗。

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　　[0004] 硒是人体必需的微量元素，缺硒会导致人体多种疾病发生。大量研究证实，硒具有 抗氧化、抗癌、免疫刺激及抑制HIV病毒复制等诸多生理功能。研究表明，无机硒是硒元素在 自然界中主要存在的形式，然而有机硒却因具有易于动物消化道吸收，较高毒性阈值及生 物利用率等优点，得到了人们广泛的接受和认可。此外，研究发现，有机硒化合物还是构成 机体内源性抗氧化防御系统的重要因子，从而降低体内自由基、活性氧及活性氮自由基对 诸如细胞膜、脂类、脂蛋白、DNA等细胞组分氧化性损伤，而这又与炎症、癌症、心血管和神经 变性疾病的发生密切相关。真菌对矿质元素具有良好的富集功能，能够吸收金属元素到子 实体中，并将无机硒转化成有机硒。大量研究表明，相比普通食用菌，富硒食用菌均具有更 高的生物活性。硒多糖作为富硒食用菌中有机硒的重要组成部分，兼有硒和多糖两者的双 重功效，研究表明，相比普通多糖，硒多糖具有更高的抗氧化、抗肿瘤及免疫增强活性。因 此，以富硒食用菌为原料开发硒多糖功能食品或加工成膳食补充剂已成为未来发展的必然 趋势。

　　[0005] 北虫草有很强的富硒和耐硒能力，利用富硒北虫草活性物质开发药物或保健品已 引起业界的广泛关注，其开发潜力大，应用前景广阔。然而，目前北虫草富硒栽培生产仍然 面临诸多限制。诸如，无机硒因价格相对低廉，长期以来始终作为富硒食用菌栽培的主要硒 源，然而无机硒对北虫草亦具有较强的毒性，添加量过高必然会大幅影响产量。因此，在不 影响北虫草产量和品质的同时，获得更高的有机硒含量和富硒率以提升富硒北虫草品质仍 然摆在当前的实际问题。此外，氮源添加是北虫草的生长发育、抗逆性及次生代谢产物特别 是虫草素的积累关键营养因素，尤其在北虫草富硒栽培中，适量的增加氮源是提升富硒虫 草的产量、品质及富硒率重要手段之一，而这在常规的避光发菌见光转色出草栽培技术又 必然会造成气生菌丝过旺而严重影响富硒北虫草产量。再有，迄今为止虽有富硒北虫草栽 培技术的研究，且富硒北虫草产品已有少量出现，但以往多集中于以单一产量和富硒率为 指标进行研究，有关其质量控制的研究和成型的技术却未有出现，其产品质量必然难以保 证。故而，针对以上问题，在现有条件下，采用多种增产方法，不断优化富硒北虫草栽培条 件，在提高富硒北虫草栽培产量的同时提升其品质，是目前丞需解决的问题。因此，本发明 在原有栽培技术基础上，利用光照增产技术，对其栽培条件进行优化，并综合考量生产实 际，提出一套高产优质北虫草的栽培方法，具有一定的现实意义和广阔的应用前景。

　　[0007] 本发明所采用的技术如下:一种高产优质富硒北虫草的栽培方法，方法如下：制作 基础栽培培养液，其配方含有：马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨15g/L，磷酸二氢钾2g/ L，硫酸镁lg/L，梓檬酸三铵lg/L，维生素 Bi50mg/L;

　　[0008] 向基础栽培培养液中添加亚硒酸钠，亚硒酸钠最终浓度为0.16g/L，制成富硒栽培 培养液；

　　[0009] 将小麦加入富硒栽培培养液中，小麦与富硒栽培培养液固液比为3: 5g/mL，常温浸 泡24~36小时，高压灭菌，制成固体小麦富硒栽培培养基，其中含有亚硒酸钠100mg/kg，7令 却后接液体菌种；

　　[0011] 在发菌阶段进行弱光照培养，光照时间24小时/天，弱光照强度为501x，光质为白 色，在培养温度为16 °C，培养湿度为30 %~50 %，培养3~5天，至菌丝布满整个培养基；

　　[0012] 菌丝转色阶段进行强光照培养，光照时间24小时/天，光照强度为3001X，光质为白 色，在培养温度为18°C，培养湿度为30 %~50 %，培养2~3天，至培养基表面菌丝由淡黄色 变为深橘黄色；

　　[0013] 菌丝诱发原基阶段弱光照与强光照每12小时交替进行培养，光照时间24小时/天， 弱光照强度为501x，强光光照强度为3001x，光质为白色，在培养温度为18°C，培养湿度为 30 %~50 %，培养10~12天，至原基完全形成；

　　[0014] 菌丝子座生长期采用黑暗与强光照每隔12小时交替进行培养，光照时间12小时/ 天，并于此时期强光照培养时添加红光，红光光照强度为ΙΟΟΙχ，白光光照强度为2001x，即 总光照强度为3001x，在培养温度为22°C，培养湿度为85%~90%，培养30~35天，至子座顶 端膨胀且不再生长；

　　[0016] 本发明可获得高产优质富硒北虫草，区别于常规富硒栽培方法，在灭菌前对富硒 栽培培养基进行常温浸泡处理，可使亚硒酸钠充分进入小麦中，相对降低培养基小麦表层 硒浓度，从而在较高硒添加量的条件下，降低无机硒对虫草的细胞毒性，提升富硒北虫草产 量和品质；在发菌阶段、转色阶段及诱发原基阶段，均采用全光照培养，可大幅降低因氮源 增加且进行避光培养而造成气生菌丝过旺对虫草转色及原基形成的影响，促进基内菌丝生 长，进而提高富硒北虫草产量和富硒率;在子座生长阶段添加红光可进一步提高硒多糖产 量和富硒率，从而达到进一步增产提质的目的。利用该方法生产栽培富硒北虫草，具有投入 少，操作简单，效果稳定等优点，产品亦具有更高的食用价值、药用价值及经济附加值。

　　[0019] 步骤一：将马铃薯去皮切成块，称取马铃薯200g/L，置于适量自来水中煮沸20分 钟，用三层纱布过滤，依次加入葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、柠檬酸三胺， 维生素也，配方为马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨15g/L，磷酸二氢钾2g/L，硫酸镁lg/ L，梓檬酸三铵lg/L，维生素 BdOmg/L，加热至溶化，制成基础栽培培养液；

　　[0020] 步骤二：向步骤一的基础栽培培养液中添加亚硒酸钠，亚硒酸钠最终浓度为 0.16g/L，制成富硒栽培培养液；

　　[0021] 步骤三:选用500mL培养瓶，每瓶加入小麦30g，富硒栽培培养液50mL，即培养基料 液比为3: 5，常温浸泡24小时后121°C高压灭菌1.5小时，制成固体小麦富硒栽培培养基，其 中含有亚硒酸钠1 〇〇mg/kg;

　　[0022] 步骤四：在超净工作台中，每瓶均匀接入液体菌种5mL，在发菌阶段进行弱光照培 养，光照时间24小时/天，弱光照强度为501x，光质为白色，在培养温度为16°C，培养湿度为 30 %，培养5天，至菌丝布满整个培养基；

　　[0023]菌丝转色阶段进行强光照培养，光照时间24小时/天，光照强度为3001x，光质为白 色，在培养温度为18°C，培养湿度为30 %，培养3天，至培养基表面菌丝由淡黄色变为深橘黄 色；

　　[0024]菌丝诱发原基阶段弱光照与强光照每12小时交替进行培养，光照时间24小时/天， 弱光照强度为501x，强光光照强度为3001x，光质为白色，在培养温度为18°C，培养湿度为 30%，培养12天，至原基完全形成；

　　[0025] 菌丝子座生长期采用黑暗与强光照每隔12小时交替进行培养，光照时间12小时/ 天，并于此时期强光照培养时添加红光，红光光照强度为lOOlx，白光光照强度为2001x，即 总光照强度为3001x，在培养温度为22°C，培养湿度为85%，培养35天，至子座顶端膨胀且不 再生长；

　　[0029]步骤一:将马铃薯去皮切成块，称取马铃薯200g/L，置于适量自来水中煮沸20min， 用三层纱布过滤，依次加入葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、柠檬酸三胺，维生 素也，配方为马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨15g/L，磷酸二氢钾2g/L，硫酸镁lg/L，柠 檬酸三铵lg/L，维生素 BdOrng/L，加热至溶化，制成基础培养液；

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　　[0030] 步骤二：向步骤一的基础栽培培养液中添加亚硒酸钠，亚硒酸钠最终浓度为 0.16g/L，制成富硒栽培培养液；

　　[0031] 步骤三:选用培养盆，每盆加入小麦500g，富硒栽培培养液850mL，常温浸泡36小时 后121°C高压灭菌1小时，制成固体小麦富硒栽培培养基，其中含有亚硒酸钠100mg/kg;

　　[0032] 步骤五:在超净工作台中，每盆均匀接入液体菌种，在发菌阶段进行弱光照培养， 光照时间24小时/天，弱光照强度为501X，光质为白色，在培养温度为16 °C，培养湿度为 50 %，培养3天，至菌丝布满整个培养基；

　　[0033]菌丝转色阶段进行强光照培养，光照时间24小时/天，光照强度为3001x，光质为白 色，在培养温度为18°C，培养湿度为50 %，培养2天，至培养基表面菌丝由淡黄色变为深橘黄 色；

　　[0034]菌丝诱发原基阶段弱光照与强光照每12小时交替进行培养，光照时间24小时/天， 弱光照强度为501x，强光光照强度为3001x，光质为白色，在培养温度为18°C，培养湿度为 50%，培养10天，至原基完全形成；

　　[0035] 菌丝子座生长期采用黑暗与强光照每隔12小时交替进行培养，光照时间12小时/ 天，并于此时期强光照培养时添加红光，红光光照强度为lOOlx，白光光照强度为2001x，即 总光照强度为3001x，在培养温度为22°C，培养湿度为90 %，培养30天，至子座顶端膨胀且不 再生长；