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　　2.在自然界中，虫草菌会侵入寄主蝙蝠蛾幼虫，并利用虫体营养繁衍菌丝。染病后的幼虫钻入土中越冬，约10月份，地温较低时，幼虫死亡成为僵虫，随着地温不断下降，僵化程度愈高。僵化的幼虫头部脱裂线处，开始长出子座。子座内有许多子囊壳，子囊壳内有子囊、每一子囊含有2～8个子囊孢子，出土的子座为子囊孢子传播、侵染昆虫创造了有利条件。

　　3.但是天然的虫草菌侵染蝙蝠蛾幼虫的过程缓慢，且自然环境下蝙蝠蛾幼虫经常受到外界其他物种的威胁，造成虫草菌成功侵染蝙蝠蛾幼虫的概率降低，虫草的形成少。因此，需要对人工方式生态抚育冬虫夏草的方法进行研究，以提高对幼虫的侵染率。

　　4.为了解决现有技术存在的问题，本发明提供了一种生态抚育冬虫夏草的方法，以提高幼虫的侵染率，提高冬虫夏草的抚育成功率。

　　5.为实现上述目的，本发明采取的技术方案是一种生态抚育冬虫夏草的方法，包括如下环节：

　　6.前接菌：是指幼虫孵化后，将子囊孢子和中华被毛孢菌丝体混合在生态基质中，对1-3个月的幼虫进行侵染，子囊孢子的密度1万～5万个/l、中华被毛孢菌丝体密度0.2～1.2g/l；

　　7.后接菌：用前接菌阶段侵染成功的幼虫的血液去感染前接菌阶段未侵染成功的幼虫，血液中芽生孢子的浓度为1万～1000万/ml；

　　8.单独饲养：将饲养1-3个月后的幼虫放入单独饲养容器，加上所述生态基质，进行后续单独抚育，直至形成冬虫夏草僵虫或者化蛹。

　　9.前接菌是通过表面侵染加吞食侵染的方式对幼虫进行侵染，后接菌是对未成功侵染的幼虫再采用注射方式、将含有芽生孢子的血液注入单条幼虫。通过该方式可有效提高最终的侵染率。之后将染菌后的幼虫放到单独饲养容器，单独饲养容器用于隔离单条虫、且每条虫不能翻出容器。

　　10.于本发明一实施例中，所述生态基质包括椰糠和土，其中椰糠占总体积比的70％～95％。

　　12.于本发明一实施例中，所述生态基质进行二次灭菌，第一次采用蒸汽高温灭菌或烘干灭菌，100～130℃下灭菌1～2h，第二次采用微波灭菌不低于10min。

　　13.于本发明一实施例中，前接菌阶段，幼虫密度不高于100条/l，采用8～18℃的低温培养，空气洁净度不高于10万颗粒/立方米。

　　14.于本发明一实施例中，还包括僵虫种植，将冬虫夏草僵虫放入灭菌后的生态基质

　　或者到野外基地，置于-4～10℃的低温环境中，长出圆基，形成圆基后，提高温度至2～15℃，在光照下产出完整的含有子座的冬虫夏草。

　　18.本发明中，子囊孢子和中华被毛菌丝体与幼虫之间的采用一定的侵染配比，在保证前接菌阶段获得一定侵染率的同时，也使后接菌得以有效进行，从而提高总体接菌率。前接菌阶段，菌含量偏低则接菌率低下，而接菌率过高，则影响幼虫存活，菌丝体对提高侵染率有辅助作用。

　　19.本发明创新性地使用前接菌与后接菌结合的方式，首先在前接菌阶段对幼虫进行侵染，之后对前接菌阶段未侵染成功的幼虫进行血液感染，通过这种方式，不仅能有效降低和控制幼虫染菌过程的成本和风险，还能够保证对幼虫的侵染率。

　　23.一种生态抚育冬虫夏草的方法，创新性采用“前接菌”+“后接菌”的侵染方式。

　　24.前接菌：按照子囊孢子菌密度1万个/l、菌丝体密度0.2g/l混合到生态基质对1-3个月的幼虫进行侵染，侵染率为5％。

　　25.后接菌：对前接菌阶段未感菌幼虫，采用针注射方式，将侵染成功的幼虫虫血稀释后注入未被菌侵染的单条幼虫，稀释后的血液中芽生孢子浓度为20万/ml，接菌率达到85％。

　　26.低龄幼虫培育(前接菌)：将卵投入，生态基质(椰糠80％+一般土20％，二次灭菌，第一次采用蒸汽高温灭菌或烘干灭菌，120度下灭菌1小时，第二次采用微波灭菌不低于10分钟)。低龄幼虫密度为100条幼虫/l。采用低温14℃培养，空气洁净度10万级。

　　27.老熟幼虫(后接菌)：低龄幼虫培育后1-3个月形成老熟幼虫，或重量超过0.3克/条后，放入单独饲养容器(隔离单条虫、且每条虫不能翻出容器)。

　　28.僵虫种植：将僵虫投入湿度50％的生态基质(椰糠80％+一般土20％)或者放到高原海拔3000米以上有记录产出过冬虫夏草的野外基地，在低温环境中(全天温度不高于10℃)，长出圆基，待形成圆基后，提高温度至10℃，在平均光照10000lx下产出完整的含有子座的冬虫夏草。

　　30.一种生态抚育冬虫夏草的方法，创新性采用“前接菌”+“后接菌”的侵染方式。

　　31.前接菌：按照子囊孢子菌密度2.5万个/l、菌丝体密度0.6g/l混合到生态基质对1-3个月的幼虫进行侵染，侵染率为30％。

　　32.后接菌：对前接菌阶段未感菌幼虫，采用针注射方式，将侵染成功的幼虫虫血稀释

　　后注入未被菌侵染的单条幼虫，稀释后的血液中芽生孢子浓度为40万/ml，接菌率达到95％。

　　33.低龄幼虫培育(前接菌)：在完成投卵后，采用生态基质，即草炭土80％+一般土20％，二次灭菌，第一次采用蒸汽高温灭菌或烘干灭菌，110度下灭菌2小时，第二次采用微波灭菌不低于10分钟。低龄幼虫密度为70条幼虫/l。采用低温10℃培养，空气洁净度10万级。

　　34.老熟幼虫(后接菌)：低龄幼虫培育后1-3个月形成老熟幼虫，或重量超过0.3克每条后，放入单独饲养容器(隔离单条虫、且每条虫不能翻出容器)，加上述生态基质，进行后续抚育。

　　35.僵虫种植：将僵虫投入湿度70％的生态基质(30％土+70％草炭土)，或放到青藏高原海拔3000米以上有记录产出过冬虫夏草的野外基地，在低温环境中(全天温度不高于10℃)，长出圆基，形成圆基后，提高温度至15度，在平均光照20000lx下产出完整的含有子座的冬虫夏草。

　　37.前接菌：按照子囊孢子菌密度5万个/l、菌丝体密度1.2g/l混合到生态基质对1-3个月的幼虫进行侵染，侵染率为50％。

　　38.后接菌：对前接菌阶段未感菌幼虫，采用针注射方式，将侵染成功的幼虫虫血稀释后注入未被菌侵染的单条幼虫，稀释后的血液中芽生孢子浓度为50万/ml，接菌率达到100％。

　　39.低龄幼虫培育(前接菌)：在完成投卵后，采用生态基质，即草炭土80％+一般土20％，二次灭菌，第一次采用蒸汽高温灭菌或烘干灭菌，110度下灭菌2小时，第二次采用微波灭菌不低于10分钟。低龄幼虫密度为50条幼虫/l。采用低温10℃培养，空气洁净度10万级。

　　40.老熟幼虫(后接菌)：低龄幼虫培育后形成的老熟幼虫，重量超过0.3克每条后，放入单独饲养容器(隔离单条虫、且每条虫不能翻出容器)，加上述生态基质，进行后续抚育。

　　41.僵虫种植：将僵虫投入湿度40％的生态基质(30％土+70％草炭土)，或放到青藏高原海拔3000米以上有记录产出过冬虫夏草的野外基地，在低温环境中(全天温度不高于10℃)，长出圆基，形成圆基后，提高温度至15度，在平均光照20000lx下产出完整的含有子座的冬虫夏草。

　　42.本发明通过研究，使子囊孢子与幼虫的配比达到最优，菌含量偏低则接菌率低下，而菌密度过高，将大量耗尽低龄幼虫营养，影响幼虫生长发育、从而影响幼虫的存活并最终影响成草的数量和质量。菌丝体有助于提高侵染率。本研究创新性地使用子囊孢子与菌丝体结合以及前接菌和后接菌结合的方式，发现采用这种抚育方式，幼虫接菌率能得到很大提高，接菌率可突破95％。

　　43.此外，考虑到子囊孢子成本较高，且为一次性投入，如果后期幼虫有类似突发性集体死亡等不可控事件发生，则前期成本全部变成沉没成本，因此采用本发明所述的前期小投入产出部分接菌幼虫，再采用后接菌进一步进行侵染的方式，不仅极大降低了抚育成本、灵活性更强，也使得整个抚育进程更可控，且配合后续的单独饲养和僵虫种植步骤，可抚育出更近似于自然野生状态的虫草，极大提高了虫草的品质，增强了产品的市场竞争力。

　　44.上述具体实施例只是用来解释说明本发明，而非是对本发明进行限制，在本发明构思和权利要求保护范围内对本发明做出的任何不付出创造性劳动的改变和替换，皆落入本发明专利的保护范围。

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